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B1 范围
本方法规定了超滤装置的截留率测定及计算方法。
B2 原理
配制不同分子量的蛋白质溶液,分别用紫外分光光度法测试料液与透过液中的蛋白质浓度,计算出超滤装置对不同分子量蛋白质的截留率。
B3 主要试剂和材料
1) 蒸馏水或同等纯度水;
2) 细胞色素C:分子量13000 冻干制剂;
3) 卵清蛋白:分子量45000 卵蛋白片;
4) 牛血清白蛋白:分子量67000 生化试剂。
B4 仪器设备
1) 紫外分光光度计;
2) 分析天平;
3) 真空干燥箱;
4) 干燥器;
5) 容量瓶、吸管、烧杯等。
B5 测试程序
B5.1 标准溶液的配制
牛血清白蛋白(bovine serum albumin)在温度105℃下真空干燥至恒重。精确称取牛血清白蛋白1.000g 溶于1000mL 容量瓶中,分别吸取牛血清白蛋白溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0(mL)置于10mL 的容量瓶中加蒸馏水稀释至刻度,配制成浓度为20、40、60、80、100(mg/L)的牛血清白蛋白标准溶液。
B5.2 标准曲线的制作
将B5.1 标准溶液于波长280nm 下,用1cm 比色皿,在紫外分光光度计上测定光密度,蒸馏水为参比液。以蛋白质浓度为横座标,光密度为纵座标作图,制出标准曲线。
B5.3 样品的测试
B5.3.1 样品溶液的配置
选择某一分子量的蛋白质,配制成浓度为1000mg/L~3000mg/L 的蛋白质溶液(卵清蛋白离心或过滤后使用),做为超滤装置性能评价的样品溶液使用。
B5.3.2 截留率的测定
配制好的样品溶液,在0.1MPa、常温条件下,通过超滤装置运转20min 后,收取透过液。原液与超滤液分别在280nm 紫外光区测定光密度,从标准曲线上查得相应的浓度。
B5.3.3 截留率的计算
同本标准附录A5.2.3。
B6 试验结果
每个试样同时取二个样品进行平行试验,以其测试值的算术平均值作为测试结果。